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InvivoGen 新品推薦:核酸轉染增強劑——NATE?

時間:2019-08-23 作者:市場部 文章來源: 瀏覽:769

產品介紹:

NATE?InvivoGen設計的一種核酸轉染增強劑,可以提高難轉染細胞的瞬轉與穩轉效率,尤其適合人的單核細胞與小鼠巨噬細胞等難轉染的細胞,如外周血單核細胞(THP-1)和小鼠單核巨噬細胞白血病細胞(RAW 264.7),且只需在平時加轉染試劑操作前30min加入NATE?即可。值得注意的是,NATE對細胞溫和,不會對細胞培養產生任何進一步的毒性。


真核細胞轉染過程中,外源性核酸(如質粒)的主要障礙被胞質傳感器檢測,cGAS/STING、AIM2炎性小體和LC3介導的自噬。這些防御信號級聯的激活常常會降低轉染率和細胞存活率,特別是在難以轉染的細胞(如免疫細胞)中會更明顯。當使用NATE?時,這些核酸傳感通路將被抑制,從而在轉染過程中保護質粒并促進其表達。




產品特色:

與常用轉染試劑 (e.g. GeneXPlus, Lipofectamine? LTX, and jetPRIME?) 及物理方法兼容。

更高的轉染率,也適用于大質粒 (> 10kb)。

在所有的轉染測試方案中都顯示對細胞溫和,沒有毒性。


產品信息:

Product Name

Unit Size

Cat. code

NATE?

1 mL (100 reactions)

lyec-nate


應用舉例


利用GeneXPlusGFP標記的質粒(3kb)瞬時轉染到THP-1細胞中,48小時后,熒光顯微鏡觀察,使用NATE?后轉染效率明顯增加。



利用GeneXPlus、Lipofectamine LTX、jetPRIME、nucleofection等常用轉染方法,將~3kb質粒()~8kb質粒()瞬時轉染至THP-1細胞。48小時后,用流式細胞術檢測轉染效率,與不使用NATE?轉染相比,數據有明顯差異變化。


詳細說明



在真核細胞轉染過程中,外來核酸(如質粒DNA)的主要障礙是它們自身被胞質核酸傳感器檢測,如黑色素瘤缺乏因子2 (AIM2)和環GMP-AMP合成酶(cGAS)介導的自噬。

AIM2是一種細胞質傳感器,與雙鏈DNA (dsDNA)結合后,會形成一種稱為炎性體的蛋白質復合物。最終,炎癥細胞因子IL-1βIL-18的成熟需要通過相應的AIM2 炎癥小體的形成和半胱天冬氨酸蛋白水解酶1caspase-1)的活化來完成。這些細胞因子的產生不利于轉染成功。


cGAS能識別dsDNA,并通過STING/TBK1/IRF3信號軸誘導I型干擾素(IFNs)的產生,以及一些干擾素刺激基因(ISGs)的表達,這些強大的效應功能,在轉染中是非常多余的。

此外,STING的激活不依賴于TBK1-INF,可以導致LC3相關的自噬。最終,自噬體將形成包含外來核酸(如質粒)的形式,并與溶酶體融合細胞中降解。



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